Análisis de Ácidos Nucleicos (UF2471) (I7148P06-02)
Curso
Online
Descripción
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Tipología
Curso
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Metodología
Online
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Horas lectivas
60h
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Inicio
Fechas a elegir
En el ámbito de agraria, es necesario conocer los diferentes campos de la realización de procedimientos experimentales con animales para investigación y otros fines científicos, dentro del área profesional ganadería. Así, con el presente curso se pretende aportar los conocimientos necesarios para realizar análisis de biología molecular en muestras biológicas.
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Materias
- Bioinformática
- Biología molecular
- Enfermedades
- ADN
- Genética
Temario
- Extracción. Purificación y análisis espectroscópico y electroforético de ácidos nucleicos.
- - Material y métodos
- Amplificación de ADN mediante PCR y variantes.
- - El ADN
- - Los enzimas
- - Los nucleótidos
- - Los cebadores
- - Limitaciones y problemas de la PCR (tamaño secuencias limitado, PCR previa, contaminación, inespecifidad de cebadores,…)
- Electroforesis y técnicas relacionadas.
- - Factores que afectan a la movilidad del ADN en el gel (masa molecular, voltaje, composición de las bases, temperatura, solución amortiguadora,…)
- - Tipos de electroforesis: PFGE (Pulsed Field Gel Electroforesis), OFAGE (Orthogonal Field Alternative Gel), FIGF (Field Inversion Gel Electroforesis), CHEF (Contour Clamped Homogeneus Electric Field), Electroforesis preparative.
- - Aplicaciones: Análisis comparativos de patrones de restricción cromosómicos, construcción de mapas cromosómicos, topología y tamaño de cromosomas, análisis de elementos extracromosómicos
- Hibridación de ácidos nucleicos.
- - Factores que influyen en la hibridación.
- - Composición de las bases.
- - Concentración de ADN/ARN y tiempos Cot y Rot
- - Concentración y tamaño de la sonda
- - Concentración ADN diana
- - Desnaturalización del ADN diana y fijación a un soporte.
- - Marcaje de una sonda monocadena
- - Hibridación: mezcla y renaturalización
- - Detección de los híbridos
- - Medio de reacción
- - Polímeros inertes
- - Tiempos de hibridación y mecanismos de detección.
- - Tipos de hibridación (soporte sólido, en fase líquida, in situ, in situ sobre cromosomas, in situ de bacterias para clonaje).
- Análisis de fragmentos de ADN.
- - Método Southerm
- - Métodos de transferencia (por capilaridad, por vacío, electroforético)
- - Aplicaciones del Método Southerm
- - Mapas de restricción
- - Detección de polimorfismos (RFLP, VNTR, STR) y deleciones.
- Secuenciación.
- - Secuenciación química, método de Maxam y Gilbert
- - Secuenciación enzimática, método de Sanger o de los dideoxinucleótidos.
- - Tipos de secuenciaciones enzimáticas (Cíclica, múltiple, automática, quimioluminiscente)
- Tecnología de microarrays y chips de ácidos nucléicos.
- - Utilidad: analizar el genoma completo de un organismo
- - Fundamento: hibridación con sondas
- - Soporte: placas microtitulación o membranas de blotting
- - Fabricación: pueden ser creados en el laboratorio o usando robótica : Macroarray: señales > 300 micras y Microarray: pocillos < 200 micras
- Aplicaciones: identificación de secuencias (genes, Mutaciones), determinación del nivel de expresión génica, descubrimiento de genes, diagnóstico de enfermedades, Farmacogenómica: desarrollo de Fármacos y Toxicogenómica: investigación Toxicológica
- Bioinformática. Bases de datos de genómica.
- - Introducción a la Bioinformática
- - Consulta de Bases de datos en biología molecular
- - Alineamiento de secuencias
- - Predicción de genes
- - Introducción a los microarrays de DNA
- Genoma: células, cromosomas y genes.
- - Definición de genoma, gen y cromosoma
- - Organización, estabilización y localización del genoma
- Estructura y función de los genes y cromosomas.
- - Estructura del ADN
- - Estructura del ARN
- - El código genético
- - Secuencias codificantes versus no codificantes
- Bases cromosómicas de la enfermedad.
- - Citogenética. El cariotipo normal en los roedores de laboratorio
- - Anomalías del número de cromosomas (Heteroploidías)
- - Anomalías de la estructura de los cromosomas
- Herencia y enfermedad: enfermedades monogénicas, patrones de herencia, enfermedades poligénicas. Susceptibilidad genética.
- - Genético
- - Congénito
- - Hereditario
- Genética de las enfermedades comunes.
- - Modelos provenientes de mutaciones espontáneas o inducidas
- - Modelos generados por transgénesis
- - Modelos generados in Vitro por manipulación de células ES
- - Modelos generados por transgénesis condicional
- Genética de la reproducción y del diagnóstico prenatal.
- - Modelos animales del desarrollo embrionario
- - Diagnóstico prenatal rápido de aberraciones cromosómicas por PCR
- - Diagnóstico citogenético
- - Diagnóstico prenatal de enfermedades hereditarias
- Diagnóstico en medicina legal y forense.
- - VNTR
- - STR
- Modelos animales de enfermedad de base genética.
- - Modelos murinos de enfermedades hereditarias simples (mendelianas): Desórdenes de la visión, de la audición, neurológicos y neuromusculares. Enfermedades de los huesos y cartílagos, de la piel y el pelo, hematológicas, inmunodeficiencias y metabólicas
- - Modelos murinos de enfermedades hereditarias complejas (multigénicas): Cáncer, obesidad, diabetes, etc.
Información adicional
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